?

Log in

No account? Create an account
k_86
14 Май 2009 @ 11:49
Зачет по темам “Генетика, экология, учение об инфекции и иммунитете”
ВОПРОСЫ К ЗАЧЕТУ
1.Материальная основа наследственности, организация генетического материала микроорганизмов.
2.Понятие о фенотипе и генотипе микробов.
3.Виды изменчивости (фенотипическая и генотипическая).Диссоциации.
4.Мутации и их разновидности. Понятие о мутагенах
5.Репарации. Виды репараций и их механизмы.
6.Генетические рекомбинации: трансформация, трансдукция, конъюгация.
7.Внехромосомные факторы наследственности бактерий. Плазмиды и их основные функции.
8.Биотехнология и генная инженерия, их практическое использование.
9.Экология микроорганизмов. Нормальная микрофлора организма человека (определение, факторы, влияющие на количественный и качественный состав)
10.Облигатная, факулоьтативная, аутохтонная и аллохтонная микрофлора.
11.Понятие о биотопе, микробиоценозе, популяции микроорганизмов.
12.Микрофлора кожи.
13.Микрофлора ротовой полости и ее значение.
14.Микрофлора желудочно-кишечного тракта
15.Роль нормальной микрофолоры кишечника
16.Дисбактериозы (определение, причины, виды)
17.Стадии патогенеза дисбактериоза
18.Лабораторная диагностика дисбактериоза кишечника
19.Принципы лечения дисбактериоза, применяемые препараты.
20.Инфекция. Инфекционный процесс. Определение. Понятия. Факторы инфекционного процесса.
21.Роль макроорганизма в развитии инфекции
22.Роль окружающей среды в развитии инфекции
23.Формы проявления инфекции
24.Местная и генерализованная инфекция. Понятие о бактериемии, токсинемии, вирусемии, сепсисе, септикопиемии
25.Виды инфекций: моноинфекция, смешанная, реинфекция, суперинфекция, рецидив, вторичная инфекция
26.Роль микроорганизмов в развитии инфекций
27.Патогенность. Вирулентность. Факторы вирулентности.
28.Эндо- и экзотоксины, основные свойства.
29.Генетический контроль патогенности.
30.Входные ворота, механизмы заражения, пути передачи инфекции. Классификация инфекционных заболеваний.
31.Экспериментальная инфекция, цели и методы ее воспроизведения.
32.Биологический метод диагностики инфекционных заболеваний.
33.Понятие об иммунитете.Виды иммунитета.
34.Факторы неспецифической резистентности. Роль кожи, слизистых.
35.Фагоцитоз.
36.Гуморальные факторы неспецифической резистентности
37.Центральные и периферические органы иммунной системы
38.Субпопуляции лимфоцитов, кооперация клеток в процессе иммунного ответа.
39.Антигены, классификация, основные свойства.
30.Антигены микроорганизмов, их характеристика.
41.Антитела, природа, строение.
42.Антитела, классы иммуноглобулинов, строение, функции.
43.Иммунопатология. Иммунодефициты.
44.Аллергия. Формы аллергических реакций.
45.Кожно-аллергические пробы.
46.Серологические реакции в диагностике инфекционных заболеваний.
47.Методы иммунологических исследований.
48.Реакция агглютинации.
49.Реакция преципитации
50.Реакция нейтрализации
51.Реакция флоккуляции
52.Реакции иммунного лизиса
53.Реакция связывания комплемента
54.Реакции с участием меченых антигенов или антител
55.РИФ, принцип метода, варианты теста.
56.РИА, принцип метода, варианты теста
57.ИФА, принцип метода, варианты теста
58.Вакцины, виды вакцин,получение
59.Живые вакцины, методы получения, достоинства и недостатки
60.Убитые, химические вакцины, методы получения
61.Анатоксины,получение, применение. Единицы измерения (ЕС)
62.Иммунные сыворотки, получение, применение.
63.Получение антитоксических и антимикробных сывороток
64.Получение иммуноглобулинов
65.Ксеногенные и аллогенные сыворотки, получение
66.Практическое использование иммунных сывороток
67.Пассивный иммунитет, принцип, продолжительность, пути создания.
68.Диагностические сыворотки, принципы получения.
69.Клиническая иммунология, определение, цели, задачи.
70.Методы оценки состояния иммунной системы организма.
71.Иммунотерапия, иммунокоррекция.


 
 
 
k_86
№№ Содержание
1 Клиническая иммунология: определение, цели и задачи
2 Подходы к оценке состояния иммунной системы организма
3 Практическое использование лабораторных методов исследования
4 Иммунотерапия
5 Клиническая микробиология (определение, цели, задачи, отличия от инфекционной микробиологии)
6 Характеристика микроорганизмов, вызывающих оппортунистические инфекции (определение, особенности)
7 Оппортунистические инфекции (определение, особенности)
8 Особенности лабораторной диагностики оппортунистических инфекций
9 Принципы профилактики и лечения оппортунистических инфекций

1.Клиническая иммунология: определение, задачи
1.1.Клиническая иммунология - самостоятельная научная дисциплина, изучающая болезни, характеризующиеся нарушением функций иммунной системы и процессы, в патогенезе которых важная роль принадлежит иммунным реакциям и/или механизмам.
1.2.Известны следующие виды нарушений функционирования иммунной системы (иммунодефицитов)
1.2.1. Врожденные 1.2.2. Приобретенные
Основные синдромы, развивающиеся при иммунодефицитах:
а) аллергический;
б) инфекционный;
в) аутоиммунный;
г) лимфопролиферативный.
1.3.Задачи клинической иммунологии:
а) диагностика иммунодефицитных состояний при различных инфекционных и неинфекционных заболеваниях;
б) донозологическая диагностика иммунодефицитов.
в) разработка способов коррекции (путем терапии) различных форм нарушения иммунитета;
г) прогнозирование эффекта проводимой терапии и ее исхода;
д) иммунологический мониторинг больных с участием в их ведении и лечении.
2.Подходы к оценке состояния иммунной системы организма
2.1.Оценка резистентности макроорганизма должна быть комплексной:
- оценка уровня естественной резистентности;
- оценка иммунного статуса.
2.2.Оценка уровня естественной резистентности:
а) оценка бактерицидной активности кожи;
б) определение показателей фагоцитоза;
в) определение факторов неспецифической резистентности (комплемент, лизоцим, -лизины и др.)
2.3.Оценка иммунного статуса
а) количественные и качественные методы оценки Т-звена иммунитета (процентное и абсолютное содержание лимфоцитов, соотношение CD4/CD8)
б) функциональные методы оценки Т-звена иммунитета -реакция бласттрансформации, оценка цитотоксической активности, лимфокинообразующей функции)
в) количественные методы оценки содержания В-лимфоцитов (абсолютное и относительное содержание CD20+ лимфоцитов)
г) функциональные тесты на активность В-клеток -реакция бласттрансформации, определение числа антителообразующих клеток (АОК) в методе локального гемолиза)
3.Практическое использование лабораторных методов исследования состояния иммунной системы
3.1.Система иммунологического мониторинга больших групп насеоения включает 4 основных этапа:
1.Клиническая долабораторная диагностика состояний, которые могут свидетельствовать о наличии иммунодефицита.
2.Лабораторное иммунологическое обследования с использованием тестов I уровня для выявления грубых количественных нарушений в иммунной системе.
3.Углубленное иммунологическое обследование по тестам II уровня в зависимости от показаний дляустановления регуляторных нарушений и дисфункций иммунитета.
4.Математический анализ полученных результатов, формирование банкаданных по проблеме “Иммунный статус человека”.
3.2.Иммунологические тесты I уровня включают определение абсолютного и относительного количества Т- и В-лимфоцитов, их соотношение, оценка функциональной активности нейтрофилов, определение содержания IgM, IgG, IgA.
3.3.Иммунологические (основные) тесты II уровня включают: определение субпопуляций лифмоцитов -Т-хелперы (CD4), Т-кикллеры/супрессоры (CD8), естественные клиллеры (CD16), В-лимфоциты (CD20);оценка их функциональной активности, определение активности комплемента, по показаниям - определение содержания IgE.
4.Иммунотерапия, ииммунокоррекция
4.1.Иммунотерапия - разнообразные способы воздействия на иммунную систему с целью прекращения патологических процессов
4.2.Цель иммунотерапии - направленное воздействие на способность организма к иммунному ответу
4.3.Иммунокоррекция - активное вмешательство в работу иммунной системы с целью устранения дефектов в ее функционировании
4.4.Цели иммунокоррекции:
а) активное воздействие на определенные звенья иммунной системы;
в) включение или блокада клонов лимфоидных клеток определенной специфичности.
5.Клиническая микробиология (определение, цель, задачи, отличие от инфекционной микробиологии.
5.1.Клиническая микробиология - раздел частной медицинской микробиологии, в котором изучаются представители нормальной микрофлоры организма человека и условно-патогенные виды, которые в норме не играют существенного эпидемиологического значения в развитии инфекционных заболеваний, но в определенных условиях могут служить причиной инфекционного заболевания.
5.2.Задачи клинической микробиологии:
а) изучение этиологии, патогенеза иммунитета пр заболеваниях, вызванных представителями нормальной или условно-патогенной микрофлоры у больных неинфекционных лечебных учреждений;
б) разработка и внедрение методов их лабораторной диагностики;
в) обоснование выбора лечебных и профилактических препаратов при лечении оппортунистических инфекций.
6.Характеристика микроорганизмов, вызывающих оппортунистические инфекции (определение, особенности)
6.1.Условно-патогенные микроорганизмы - группа микробов, вызывающих заболевания лишь при определенных условиях, связанных, главным образом, со снижением резистентности макроорганизма.
6.2.Основное значение имеют представители родов: Staphylococcus, Streptococcus, Echerichia, Enterobacter, Klebsiella, Serrtia, Proteus, Pseudomonas, Haemophylis, Bacteroides, Candida и др.)
6.3.Особенности условно-патогенных микроорганизмов:
а) экологическая неоднородность;
б) преимущественно являются факультативными обитателями биотопов человека или животных;
в) устойчивость к действию антибиотиков бактериофагов, дезинфектантов;
г) полиорганотропность.
7.Оппортунистические инфекции (определение, особенности)
7.1.Оппортунистические инфекции - инфекционные заболевания, вызванные слабо- или условно-патогенными видами миароорганизмов.
7.2.Группы заболеваний, вызываемые условно-патогенными микроорганизмами:
а) гнойно-воспалительные и септические;
б) кишечные инфекции;
в) заболевания верхних дыхательных путей.
7.3.Отличия оппортунистических инфекций от инфекционных болезней
а) поражение различных органов и тканей;
б) тенденция к генерализации местных процессов;
в) широкое распространение в больничных стационарах;
г) слабый иммунный ответ на возбудителя.
8. Особенности лабораторной диагностики оппортунистических инфекций
8.1.Задачи микробиологических методов исследования в диагностике оппортунистических инфекций:
а) выявление болезнетворного микроба (вида), доказательство его участия в развитии оппортунистической инфекции вкаждом конкретном случае;
б) выполнение иммунологических тестов;
в) выявление источников инфекции и путей ее передачи.
8.2.Критерии оценки роли условно-патогенных микроорганизмов в патологии:
а) выделение микроорганизмов из органов и тканей, которые в норме являются стерильными;
б) обнаружение условно-патогенных микроорганизмов в исследуемом материале в необычайно больших количествах;
в) повторное выделение культуры одного и того же вида из различных проб патологического материала;
г) нарастание титра (4-кратное, не менее,чем на 2 ступени разведения) специфических антител при проведении серодиагностики.
8.3.Методы клинико-диагностических микробиологических исследований при оппортунистических инфекциях:
микроскопические, биохимические, бактериологические, серологические, аллергологические


 
 
 
k_86
14 Май 2009 @ 11:49
ВАКЦИНЫ И СЫВОРОТКИ
№№ Содержание
1 Развитие учения о вакцинах и сыворотках
2 Вакцины (определение, классификация, краткая характеристика, применение
3 Сыворотки ииммуноглобулины
1.Развитие учения о вакцинах и сыворотках
1.1.Вариоляция - исскуственное заражение здоровых людей с целью предотвращения заболевания во время эпидемий
1.2.Вакцинация - введение вакцин в здоровый организм с целью предупреждения инфекционных заболеваний.
2.Вакцины (определение, классификация, краткая характеристика, применение)
2.1.Вакцины - биологические препараты, получаемые из живых аттенуированных микроорганизмов, убитых патогенных микробов, продуктов их жизнедеятельности или антигенных компонентов а также их синтетические и генно-инженерные аналоги, применяемые для активной иммунизации с целью профилактики и лечения инфекционных болезней.
2.2.Классификация вакцин
Признак, свойство Название вакцин
По характеру действующего начала а) живые; б) убитые в) химические г) синтетические;
д) генно-инженерные; е) анатоксины
ж) антиидиотипические
По числу и составу антигенов а) моновакцины; б) поливакцины; в) ассоциированные;
г) комбинированные
По назначению а) профилактические; б) лечебные
По видовому составу а) бактериальные; б) вирусные;
в) противогрибковые
2.3.Аутовакцины - вакцины, изготовленные из выделенных от больного патогенных или условно-патогенных микробов и используемых для его лечения.
2.4.Живые вакцины - биологические препараты, изготовленные на основе живых ослабленных (аттенуированных) по вирулентности но сохранивших иммуногенные свойства микробов.
2.5.Убитые (инактивированные) вакцины - биологические препараты, изготовленные на основе убитых патогенных микробов, обладающих иммуногенными свойствами
2.6.Химические (субъединичные) вакцины - биологические препараты, изготовленные из наиболее иммуногенных компонентов патогенных микробов.
2.7.Анатоксины - токсины, утратившие свои токсические, но сохранившие иммуногенные свойства.
2.8.Адъюванты - вещества различного происхождения и химической природы, вызывающих неспецифическое усиление иммунного ответа при введении в организм вместе с антигеном.
2.9.Синтетические вакцины - препараты с известной химической структурой, имитирующей антигены микроорганизмов и используемые для создания активного иммунитета.
2.10.Генно-инженерные вакцины - препараты, изготовление которых включает применение методов генной инженерии с целью конструирования клеток, синтезирующих антигены с заранее заданными свойствами.
2.11.Антиидиотипические вакцины - препараты, активным началом которых являются антиидиотипические антитела, полученные при иммунизации доноров соответствующими антигенами.
2.12.В России в плановом порядке вакцинируют против следующих заболеваний:
а) туберкулез; б) столбняк; в) дифтерия; г) коклюш; д) паротит; е) корь;
д) полиомиелит.
3. Сыворотки и иммуноглобулины
3.1.Сыворотки - жидкая часть крови, лишенная форменных элементов крови и фибриногена.
3.2.Классификация сывороточных препаратов
Признак Наименование
По видовому происхождению а) аллогенные
б) ксеногенные
По содержанию специфических антител а) нормальные
б) иммунные
По целевому назначению а) лечебно-профилактические
б) диагностические
По направленности действия а) антимикробные
б) антитоксические
По наличию антител различной специфичности а) моноспецифические (моновалентные)
б) полиспецифические (поливалентные)
3.3.Активность антитоксических сывороток измеряют в МЕ или АЕ. За 1 АЕ принимают минимальное количество сыворотки, предохраняющиее животных (лабораторных, определенного веса и возраста) от гибели при введении определенной дозы токсина.
3.4.Для получения антитоксических сывороток животных иммунизируют в два этапа:
а) на первом этапе - анатоксином;
б) на втором этапе -токсином
3.5.Иммуноглобулиновые препараты представляют собой ощищенную и концентрированную фракцию гамма-глобулинов сыворотки крови, содержащую специфические антитела.
3.6.Сыворотки и иммуноглобулины используются с целью:
а) лечения; б) профилактики; в) диагностики.
3.7.Для предупреждения осложнений перед введением ксеногенных сывороток определяют индивидуальную чувствительность
3.8.Диагностические адсорбированные сыворотки получают по методу Кастеллани. Суть его заключается в а) иммунизации животных (обычно кроликов) убитыми культурами патогенных бактерий, при этом образуются полиспецифические антитела; б) полученные сыворотки адсорбируют специально подобранными взвесями микробов с определенными антигенными свойствами -в результате адсорбции нежелательные сопутствующие антитела удаляются, оставшиеся в сыворотке антитела являются моноспецифическими и в дальнейшем используются для диагностических исследований. Контроль качества полученных сывороток проводят со стандартизованными штаммами бактерий известной антигенной структуры.

 
 
 
k_86
14 Май 2009 @ 11:48
“Иммунологические методы. Серологические реакции в диагностике инфекционных и неинфекционных заболеваний”
Различают методы 3-х уровней:
Уровень Принципы Примеры Достоинства Недостатки
Методы первого уровня О взаимодействии антигена с антителом судят по изменениям физических или химических свойств (изменение растворимости, активности ферментов, радиоактивности, появлению флюоресценции и др.) Реакции с использованием меченых антигенов или антител
(ИФА,
РИА,
РИФ) Чрезвычайно высокая
чувствительность частые неспецифические и/или трудно интерпретируемые результаты, необходимость специального дорогостоящего оборудования
Методы второго уровня О взаимодействии антигена с антителом судят по вторичным изменениям, которые оценивают визуально Реакции:
 преципитации, агглютинации, связывания комплемента, иммунного лизиса, коагглютинации РПГА Простота выполнения, отсутствие в необходимости использовать специальное дорогостоящее оборудование, высокая специфичность Меньшая чувствительность в сравнении с методами первого уровня
Методы третьего уровня Оценку реакции проводят по реакции организма в целом Кожно-аллергические пробы , реакция нейтрализации О патогенных свойствах антигенов (токсинов)или антител судят по реакции организма in vivo Ограниченные возможности применения, опасность анафилактических реакций, развития или усиления уровня сенсибилизации
1. Серологические реакции: определение, компоненты, механизм, практическое использование
1.1. Серологические реакции - реакции специфического взаимодействия между антигеном и антителами
1.2. По количеству компонентов различают реакции:
а) двухкомпонентные; б) многокомпонентные
1.3.Сероидентификация - идентификация специфичности неизвестных антигенов с помощью стандартизованных антител.
1.4.Серодиагностика - идентификация специфичности неизвестных антител с помощью набора стандартизованных антигенов.
2.Реакция агглютинации. Определение, компоненты, механизмы, Учет результатов, применение. Варианты реакции.
2.1.Реакция агглютинации - специфическое взаимодействие антигенов и антител, проявляющее себя в виде склеивания частиц (корпускул), несущих антиген в присутствии электролита.
Протекает в 2 фазы:
а) атака антигена антителами;
б) формирование агглютинационной белковой решетки
2.2.Компоненты реакции
а) корпускулярный антиген (бактерии, эритроциты и др.)
б) специфические антитела (сыворотки, стандартные или исследуемые)
2.3. Титр агглютинирующей сыворотки - величина, обратная тому наибольшему разведению сыоротки, в котором наблюдается различимая агглютинация.
2.4. Варианты реакции - качественная (“да” или “нет”) и развернутая, полуколичественная с определением титра. Может быть выполнена на плоскости, предметном стекле, в пробирках, в лунках полистироловых планшет.
Центрифугирование проб ускоряет формирование агглютинационной решетки.
3.Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Реакция торможения пассивной гемагглютинации (РТПГА).
3.1.РПГА-специфическое взаимодействие антители антигенов, один из которых предварительно адсорбирован на корпускулярных носителях (эритроцитах или частицах латекса).
3.2.Достоинства РПГА:
а) высокая чувствительность;
б) простота выполнения;
в) возможности широкого применения.
3.3.РТПГА (реакция торможения пассивной гемагглютинации)
3.4.Компоненты РТГА:
а) исследуемый антиген;
б) специфическая диагностическая сыворотка;
б) эритроцитарный антительный диагностикум.
Положительные результаты - исследуемые антитела связаны с диагностическим антигеном, который недоступен для антител, пассивно фиксированных на индикаторных эритроцитов - отсутствие агглютинации
Отрицательные результаты - исследуемых антител в пробе нет, антиген остается доступным для антител, адсорбированных на индикаторных эритроцитах и вступает с ними в реакцию - агглютинация наступает
4.Реакции Кумбса, коагглютинации
4.1.Реакция Кумбса -специфическое взаимодействие антигенов и IgG антител, которое выявляется с помощью антиглобулиновых (анти-IgG) антител.
Широко применяется в иммуногематологии.
4.2.Компоненты реакции Кумбса для выявления иррегулярных аллоиммунных противоэритроцитарных антител класса IgG многих систем, прежде всего системы Rh.
а) стандартизованные эритроциты O(I)Rh+
б) исследуемая сыворотка
в) антиглобулиновая сыворотка (анти-IgG противочеловеческая, от кроликов или коз)
4.3.Применение реакции Кумбса
4.3.1. Диагностика Rh-конфликта во время беременности
4.3.2.Диагностика аутоиммунных состояний (адсорбция аутоантител класса IgG и/или комплемента на эритроцитах), аутоиммунных гемолитических анемий.
4.4.Реакция коагглютинации -специфическое взаимодействие антигенов с антителами, предварительно адсорбированными на стафилококках за счет способности протеина А клеточной стенки стафилококка связывать Fc-фрагменты IgM и IgG. Активные центры антител (Fab, паратопы) при этом остаются доступными длявзаимодействия с антигеном.
РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ
№№ Содержание
1 Реакция преципитации: определение, компоненты, механизм, применение
2 Варианты реакции преципитации
3 Реакция флокулляции: определение, механизмы, применение
4 Реакция нейтрализации: определение,механизмы, применение
1.Реакция преципитации: определение, механизмы, компоненты, применение
1.1.Реакция преципитации - специфическое взаимодействие растворимого (мелкодисперсного)антигена и антитела проявляющая себя в виде образования нерастворимого осадка (преципитата)
1.2.Основные компоненты реакции преципитации
а) растворимый антиген;
б) специфические антитела (сыворотка)
1.3.Особенность антигена для реакции преципитации
должен быть растворимым или мелкодисперсным
1.4.Практическое применение
а)серодиагностика
б)сероидентификация
В связи с высокой чувствительностью реакцию преципитации в практике используют для:
а)обнаружения следовых количеств антигена в различных исследуемых материалах;
б)изучения антигенной структуры бактерий;
в)в судебно-медицинской практике для определения видовой принадлежности белков крови, слюны и других биологических жидкостей;
г)для выявления фальсификации пищевых продуктов.
2.Варианты реакции преципитации
Варианты реакции Трактовка результатов
а)реакция преципитации в пробирках образование нерастворимого осадка на дне пробирки
б)реакция кольпреципитации образование кольца преципитата на границе двух жидкостей (одна из них - диагностическая тест-система, другая -исследуемая сыворотка или экстракт исследуемого материала
в)реакция диффузной преципитации в геле образование колец преципитации
г)иммуноэлектроферез (реакция протекает в электрическом поле постоянного тока. образование линий или (чаще) дуг преципитации
3.Реакция флокулляции: определение, компоненты, механизмы, применение
3.1.Реакция флокулляции - специфическое взаимодействие токсина (антигена) с антитоксической сывороткой (антитела) с образованием нерастворимого осадка.
3.2.Практическое применение:
а) определение силы токсина;
б) определение антитоксической активности сывороток при их стандартизации.
4.Реакция нейтрализации: определение, компоненты, механизмы, применение
4.1.Реакция нейтрализации - специфическое взаимодействие токсина (антигена) с антитоксической сывороткой (антитела), выражающееся в нейтрализации токсина in vivo.
4.2.Практическое применение
а) определение вида токсина;
б) определение титра антитоксической сыворотки;
в) пробы Шика, Дика.
ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕЧЕНЫХ АНТИГЕНОВ ИЛИ АНТИТЕЛ. ИММУНОБЛОТИНГ
№№ Содержание
1 Общая характеристика иммунологических реакций с использованием меченых антигенов или антител
2 РИФ, характеристика метода, его варианты
3 РИА, характеристика метода, его варианты
4 ИФА, характеристика метода, его варианты
5 Иммуноблоттинг
1.Общая характеристика реакций с использованием меченых антигенов или антител
Наименование метода Метка Выявление меток
РИФ (реакция иммунофлюоресценции) Флюорохромы Люминисцентный микроскоп, проточный цитофлюориметр
РИА (радиоиммунный анализ) Радиоизотопы Счетчик радиации
ИФА (иммуноферментный анализ) Ферменты Изменение цвета среды, иммуноферментный анализатор
2.РИФ, характеристика метода, варианты, применение
- при взаимодействии антигена и антитела образуются комплексы, о чем судят по выявлению меток при люминесцентной микроскопии (свечение)
2.2. Компоненты реакции
Прямая РИФ Непрямая РИФ
а) исследумый антиген а) исследумый антиген
б) специфические антитела с флюоресцентной меткой (диагностическая сыворотка) б) специфические антитела (диагностическая сыворотка)
 в) антиглобулиновая сыворотка с флюоресцентной меткой
3.РИА, характеристика метоад, варианты, применение
3.1.Принцип метода - специфическое связывание антигена и антитела приводит к образованию комплексов, о чем судят по изменению уровня радиоактивности с помощью счетчика.
3.2.Компоненты реакции
Прямой РИА Конкурентный РИА
а) исследуемая сыворотка а) специфическая сыворотка
б) антиген, меченый изотопом б) стандартный диагностикум, меченый изотопом
 в) исследуемый антиген
3.3.Недостатки РИА
а) радиоактивные метки быстро разрушаются;
б) требуется специальное дорогостоящее оборудование;
в) специальная подготовка медицинского персонала;
г) негативное воздействие на здоровье персонала.
4.ИФА, характеристика метода, варианты, применение
4.1.Принцип метода - специфическое взаимодействие антигена и антитела приводит к образованию комплексов, которые выявляют после активации ферментной метки путем добавления субстрата, последнее приводит к изменению цвета индикатора.
4.2.Компоненты реакции
Прямой ИФА (“сэндвич-метод”) Непрямой ИФА
а) исследуемый материал (антиген) а) исследуемая сыоротка (антитела)
б) специфическая диагностическая сыворотка б) диагностикум (антиген)
в) специфическая сыворотка с ферментной меткой в) антиглобулиновая сыворотка с ферментной меткой
5.Иммуноблотинг
5.1.Иммуноблоттинг - выявление антител (реже - антигенов) к определенным антигенам (реже - антителам)
5.2. Принцип метода: разделенный с помощью электрофереза комплекс антигенов наносят на полоску из нитроцеллюлозы. При этом различные антигены фиксируются раздельно в различных участках полоски. Дальнейшее исследование проводят по схеме ИФА - контакт с исследуемой сывороткой - добавление антиглобулиновой сыворотки с ферментной меткой - добавление субстрата для фермента (с целью его активации).
РЕАКЦИИ ИММУННОГО ЛИЗИСА. РЕАКЦИЯ СВЯЗЫВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТА (РСК)
№№ Содержание
1 Реакции лизиса, определение, механизмы, компоненты
2 Реакция бактериолиза, определение, механизмы, применение
3 Реакции гемолиза, определение, механизмы, применение
4 РСК, определение, механизмы, применение
1.Реакции лизиса, определение, компоненты, механизмы
1.1.Реакции лизиса - специфическое взаимодействие антигенов и антител, которое выражается в растворении антигена в присутвии комплемента.
2.Реакция бактериолиза
2.1.Реакция бактериолиза - лизис бактерий в присутствие специфических антител и комплемента
2.2.Компоненты реакции:
а) антиген (представлен на клеточной стенке бактерий);
б) антитела (в данном случае их называют бактериолизины иммунной сыворотки);
в) комплемент.
3.Реакции гемолиза, определение, компоненты, применение
3.1.Компоненты реакции:
а) 3% взвесь эритроцитов барана (антиген);
б)гемолитическая сыворотка (антитела кроличьего происхождения, получают путем иммунизации эритроцитами барана);
в) комплемент (чаще сыворотка кролика илиморской свинки).
4.РСК, определение, компоненты, применение
4.1.РСК - специфическое взаимодействие антигена с антителами, при этом образующийся комплекс адсорбирует комплемент. Результаты реакции учитывают после введения в реакцию гемолитической системы.
4.2.Компоненты реакции
а)исследуемая сыворотка;
б)антиген - взвесь убитых бактерий;
в)комплемент (сыворотка кролика или морской свинки)
г)эритроциты барана (3% взвесь);
д)гемолитическая сыворотка (сыворотка кролика, иммунизированного эритроцитами барана)
4.3.Схема РСК
Опытная система антиген - антитело
Комплемент Индикаторная система Результаты и их интерпретация
Антиген и антитела связались С Эритроциты барана + гемолитическая сыворотка Положительный, задержка или отсутствие гемолиза
Антиген и антитела не связались С Эритроциты барана + гемолитическая сыворотка Отрицательный, гемолиз
Пояснения к реакции - в данном методе опытная (исследуемая) и индикаторная (гемолитическая) системы конкурируют между собой за связывание комплемента. Если в опытной пробе произошло взаимодействие антиегна иантитела, то именно она свяжет комплемент, его не останется чтобы вызвать гемолиз в индикаторной системе. Таким образом, положительный результат - отсутствие гемолиза после добавления индикаторной системы. Напротив, при отсутствии взаимодействия в опытной тест-системе комплемент останется не связанным и после добавления индикаторной системы вызовет гемолиз - наличие гемолиза означает отрицательный результат.
Для получения достоверного результата необходимо, чтобы все компоненты были взяты в оптимальных количествах,т.н. рабочих дозах. С этой целью как комплемент, так и гемолитическую сыворотку предварительно титруют для последующего расчета их рабочих доз.
4.4.Титр комплемента - наибольшее разведение комплемента, который вызывает полный гемолиз эритроцитов в присутствии гемолитической сыворотки.
4.5.Рабочая доза комплемента на 20 - 30% выше титра.
4.6.Титр гемолитической сыворотки - максимальное ее разведение, обеспечивающее полный гемолиз эритроцитов в присутствии комплемента.
4.7.Рабочая доза комплемента сыворотки равна тройному титру.

 
 
 
k_86
14 Май 2009 @ 11:48
“Иммунная система организма человека. Формы иммунного ответа. Иммунопатология”.

№№ Содержание
1 Иммунная система. Центральные и периферические органы. Возрастные особенности
2 Иммунокомпетентные клетки, их характеристики
3 Кооперация клеток в процессе иммунного ответа
4 Формы иммунного ответа
5 Иммунопатология. Иммунодефицитные состояния
6 Основные синдромы, указывающие на наличие иммунодефицитов
7 Принципы диагностики иммунодефицитных состояний

1.Иммунная система. Центральные и периферические органы иммунной системы. Возрастные особенности.
1.1.Иммунная система обеспечивает - защиту организма от генетически чужеродных молекул и клеток с целью поддержания индифидуальности как неотъемлемой части гомеостаза.
1.2.Органы иммунной системы
Центральные(первичные) Периферические (вторичные)
а) тимус б) бурса а) лимфоузлы б) селезенка в) небные
миндалины г) аппендикс д) пейеровы бляшки е) лимфоидные скопления в коже и других органах
1.3.Центральной клеткой иммунной системы является лимфоцит
2.Иммунокомпетентные клетки, их характеристики
2.1.Функции иммунокомпетентных клеток
Клетки Основные функции
Фагоциты
а)гранулоциты
б)мононуклеары и макрофаги а) фагоцитоз б) секреция интерлейкинов, цитокинов
в) процессирование антигенов и их презентация (макрофаги)
Т-лимфоциты
а)Т-хелперы
в)Т-супрессоры
г)Т-киллеры клеточные формы иммунного ответа,
 участие в межклеточной кооперации
регуляция иммунного ответа
В-лимфоциты гуморальный иммунный ответ
О(нулевые) лимфоциты (ни Т ни В)
а)К-клетки
б)L-клетки Антителозависимый лизис клеток-мишеней

ЕКК (естественные киллерные клетки) Антителонезависимый лизис клеток-мишеней
3.Кооперация клеток в процессе иммунного ответа
3.1.В процессе любого первичного иммунного ответа выделяют 3 фазы:
Фазы Основные процессы
Афферентная распознавание антигена, его захват, процессирование, презентация
Центральная Межклеточная кооперация, образование клеток-эффекторов
Эфферентная Реализация иммунного ответа того или иного типа, формирование иммунологической памяти
4. Формы и феномены иммунного ответа
Формы иммунного ответа Основные эффекторы Физиологическое значение
Гуморальный Антитела Защита от бактерий, вирусов,чужеродных клеток, активация комплемента, опсонизация с усилинием фагоцитоза Аллергические реакции типов I- III.
Клеточный Т-киллеры Цитотоксические эффекты, синтез цитокинов, отторжение трансплантатов, аллергические реакции IV типа
Иммунологическая толерантность Т-супрессоры Отсутствие иммунного ответа на собственные и определенные антигены
Иммунологическая память Долгоживущие Т- и В-лимфоциты с изменениями в геноме, возникшие в результате первичного иммунного ответа Реализация вторичных иммуного ответа при повторном попадании антигенов в сенсибилизированный организм
1.Иммунопатология. Иммунодефицитные состояния.
1.1.Иммунопатология - раздел иммунологии, изучающий заболевания, возникающие в результате дисфункций того или иного звена иммунитета.
1.2.Иммунодефицит - нарушения иммунологической реактивности, обусловленное дисфункциями одного или более звеньев иммунитета и/или факторов неспецифической резистентности.
1.3.Виды иммунодефицитов
а) врожденные б) приобретенные
Врожденные иммунодефициты связаны с генетическими дефектами онтогенеза иммунной системы, которые детерминируют дисфункции тех или иных звеньев иммунитета.
Приобретенные иммунодефициты возникают в результате нарушений иммунорегуляции, связанных с перенесенными инфекциями, травмами, иммуносупрессивной терапией и прочими неблагоприятными воздействиями.
1.4.Основные синдромы, развивающиеся при иммунодефицитах
а) аллергический; б) инфекционный; в) аутоиммунный г) лимфопролиферативный
2.Аллергия. Аллергические реакции
2.1.Аллергия - состояние повышенной чувствительности к различным антигенам (аллергенам), развившееся в результате сенсибилизации (первычный иммунный ответ) последними. Последнее характеризуется изменением реактивности на аллергены.
2.2.Сенсибилизация - состояние повышенной чувствительности к антигену (аллергену), развившееся в результате первичного иммунного ответа.
2.3.Аллерген - антиген, вызвавший сеснсибилизацию и последующие аллергические реакции.
2.4.Основное свойство аллергенов - специфичность.
2.5.Классификация аллергенов
а)эндоаллергены
б) экзоаллергены 1.Микробные (бактерии, вирусы, грибы и/или их метаболиты
 2.Немикробные растительные, эпидермальные, пищевые, лекарственные, производственные
2.6. Аллергические реакции протекают в 3 фазы:
1. Иммунологическая
2. Патобиохимическая
3. Патофизиологическая
2.7.Классификация аллергических реакций по Джеллу и Кумбсу
Тип Стадии Основные клинические проявления
I.IgE-опосредованные (анафилактические а) взаимодействие IgE с аллергеном при участии тучных клеток
б) выброс гистамина, серотонина и других медиаторов
в) появление вторичных изменений, вызванных медиаторами Анафилактический шок, сенная лихорадка, отек Квинке, крапивница
II.Цитотоксичекие а) взаимодействие антигена и антитела
б) активация комплемента или К-клеток
в) разрушение клеток-мишеней Аутоиммунизация, гемолитическая болезнь новорожденных, гемотрансфузионные реакции
III.Реакции иммунных комплексов а) образование иммунных комплесов в результате связывания антигенов и антител
б) Адсорбция иммунных комплексов на мембранах клеток различных органов
в) активация комплемента и К-клеток, повреждение тканей, нарушения микроциркуляции, возникновение очагов воспаления и некроза Сывороточная болезнь, феномен Артюса, аутоиммунные заболевания с поражением соединительной ткани (ревматоидный артрит, СКВ и др.)
IV.Клеточно-опосредованные а) распознавание антигенов сенсибилизированными Т-киллерами
б) образование комплексов Т-клетка+антиген, атака клеток-мишеней с их повреждением
в) возникновение вторичных воспалительных проявлений,связанных с активацией фагоцитов и их лизосомальных ферментов, нарушениями микроциркуляции Контактная аллергия, экзема, отторжение трансплантатов
3. Аутоиммунныепроцессы
3.1.Аутоиммунные процессы - состояния, возникающие в результате иммунного ответа на аутоантигены с накоплением клотов Т-и/или В-лимфоцитов, сенсибилизированных к собственным антигенам.
4. Принципы диагностики иммунопатологии


 
 
 
 
k_86
14 Май 2009 @ 11:47
 “Введение в иммунологию. Факторы неспецифической резистентности.Антигены. Антитела”.
№№ Содержание вопросов
1 Иммунология как наука. Этапы ее становления
2 Невосприимчивость к возбудителям инфекционных заболеваний. Иммунитет. Виды иммунитета.
3 Факторы неспецифической резистентности.
4 Фагоцитоз.
5 Особенности противовирусного иммунитета.
6 Антигены. Определение. Основные свойства, химическая природа, строение
7 Антигены микроорганизмов, их основные характеристики
8 Антигены человека и животных
9 Антитела. Определение, химическая природа, строение, виды антител
10 Характеристика основных классов иммуноглобулинов
11 Динамика образования и функции антител
12 Антителогенез (теории образования антител)
13 Моноклональные антитела, характеристика, принцип получения



1.Иммунология как наука. Этапы ее становления.
1.1.Иммунология - наука о защитных реакциях организма на генетически чужеродные агенты.
2.Невосприимчивость к возбудителям инфекционных заболеваний. Виды иммунитета.
2.1.Невосприимчивость к возбудителям инфекционных болезней
1) врожденная
а) видовая невосприимчивость
б) неспецифическая резистентность
2) приобретенная (иммунитет)
а) естественный активный (после перенесенныхинф.заболеваний)
б) естественный пассивный (грудное вскармливание новорожденного, трансфер материнских IgG через плаценту к плоду)
в) искусственный активный (вакцинация, иммунизация)
г) искусственный пассивный (после введения лечебных сывороток, иммуноглобулинов, переливания плазмы от гипериммунных доноров)
По специфичности:
1.Антитоксический - образовавшиеся антитела нейтрализуют бактериальные токсины
2.Антимикробный - антитела реагируют со структурами бактериальных клеток.
По наличию возбудителя в организме:
1.Стерильный - возбудитель отсутствует в организме
2.Нестерильный - возбудитель присутствует в организме и поддерживает состояние иммунитета
2.2.Иммунитет - способ защиты организма от живых тел и веществ, несущих на себе признаки генетической чужеродности.
3.Факторы неспецифической резистентности. Особенности противовирусного иммунитета.
3.1.Факторы неспецифической резистентности:
Тканевые, клеточные Гуморальные Общефизиологические
Клеточная ареактивность Система комплемента Выделительные системы
Кожа и слизистые Пропердиновая система Перистальтика кишечника
Желудочный сок Лизоцим Ресничатый эпителий
Нормальная микрофлора Интерфероны Кашель
Естественные киллерные клетки Лейкины Насморк, чихание
Фагоцитоз Эритрины Рвота
Воспаление -лизины Повышение температуры
3.2.Комплемент - система термолабильных сывороточных протеинов, при активации дающая каскадную реакцию. Включает 9 компонентов, с учетом субкомпонентов состоит из около 30 протеинов.
3.3.Биологические функции комплемента
а) лизис клеток-мишеней
б) иммунное прилипание
в) усиление фагоцитоза
г) участие в остром воспалении
д) аллергические реакции, активация свертывающей системы крови
3.4.Неспецифические факторы противовирусной защиты
а)клеточная ареактивность - отсутствие рецепторов для возбудителя
б)В-ингибиторы - липопротеиды сыворотки крови, способные связывать вирусные частицы
в)повышение температуры - торможение репликации вируса
г)интерференция - способность одних вирусов препятствовать репликации других
д)интерфероны - нарушение трансляции вирусных РНК на рибосомах
4.Фагоцитоз
4.1.Фагоцитоз - процесс активного поглощения специализированными клетками организма микробов и других чужеродных частиц с их последующим перевариванием
4.2.Стадии фагоцитоза
а) хемотаксис
б) адгезия
в) эндоцитоз
г) внутриклеточное переваривание
4.3.Показатели фагоцитарной активности
а)фагоцитарный индекс - % фагоцитирующих клеток
б)фагоцитарное число - отражает интенсивность фагоцитоза, среднее количество поглощенных частиц на 1 фагоцитирующую клетку
5.Антигены. Определение, основные свойства, химическая природа и строение
5.1.Антигены - вещества, несущие на себе признаки генетической чужеродности и вызывающие при введении в организм развитие специфических иммунных реакций.
5.2.Основные свойства антигенов:
а) иммуногенность б) антигенность в) специфичность
5.3.Полноценные антигены - антигены, обладающие всеми основными свойствами
5.4.Гаптены - антигены, лишенные носителя (шлеппера). Вызывают иммунный ответ только будучи конъюгированными с высокомолекулярными носителями.
5.5.Иммуногенность - способность вызывать иммунный ответ.
5.6.Иммуногенность определяется чужеродностью антигена, его химической природой и молекулярной массой.
5.7.Специфичность - уникальное биологическое свойство, способность взаимодействовать только с теми антителами, образование которых инициировано данным антигеном.
5.8.Специфичность антигена определяется:
а) количеством, видом, последовательностью аминокислот;
б) пространственной структурой
5.9.Антигенная детерминанта, эпитоп - часть(и) антигена, определяющая(щие) ее специфичность.
5.10.Валентность антигена определяется - количеством детерминантных групп (эпитопов)
6. Антигены микроорганизмов
6.1.Основные антигены микроорганизмов
Название антигена Химическая природа Отношение к воздействию высоких температур
а) Н-жгутиковые Белок флагеллин Термолабильны
б) О-соматические Липополисахариды Термостабильны
в) К-капсульные Полисахариды
7. Антигены человека и животных
7.1.Ксеноантигены - антигены, определяющие различия между различными видами
7.2.Аллоантигены - определяют внутривидовые различия между особями
7.3.Аутоантигены - антигены, являющиеся чужеродными для иммунной системы собственного организма, в норме защищены от нее барьером
7.4.Гетероантигены - антигены общие как для некоторых видов микроорганимов, так и животных, возникли в процессе эволюции в результате феномена антигенной мимикрии.
8.Антитела. Определение, химическая природа, строение, виды
8.1.Антитела - гликопротеины, образующиеся в ответ на поступающие антигены и способные с ними специфически связываться.
8.2.Fab-фрагменты отвечают за связывание с антигеном
8.3.Fc-фрагменты отвечают за связь с комплементом, рецепторами макрофагов, гранулоцитов и лимфоцитов
8.4.Активные центры антител (паратопы) - N-концевые последовательности вариабельных участков легких и тяжелых цепей, отвечающие за связь с антигеном.
8.5.Валентность антител определяется количеством активных центров (паратопов)
9.Характеристики основных классов иммуноглобулинов
 Классы иммуноглобулинов
 IgG IgM IgA IgE IgD
Молекулярная масса 150000 900000 170000 190000 180000
Процентное содержание в сыворотке крови 70-80 5-10 10-15 0,01 0,4-0,5
Валентность (количество активных центров) 2 10 2(4) 2 2
Способность преодолевать плаценту + - - - -
Наличие в молозиве + + + - -
Способность связывать комплемент  + - - -
Число мономеров в молекуле 1 5 1(2) 1 1
 - одни субклассы обладают такой способностью, другие -нет
10.Динамика образования и функции антител
10.1.Динамика образования антител в процессе первичного иммунного ответа на бактериальные антигены
Периоды Продолжительность Краткая характеристика
Латентный 3- 3дня Период от момента попадания антигена до первого эпизода выявления антител
Продуктивный (логарифмический) 7-8 день Нарастание концентрации антител в логарифмической прогрессии
Максимума 14-30 дней Максимальный уровень содержания антител
Снижения с 30 дня (индивидуальные различия) Снижение титра антител
11.Моноклональные антитела, характеристика, принципы получения
11.1.Моноклональные антитела - иммуноглобулины одной специфичности, исскуственно полученные путем получения гибридомных клеток.
11.2.Основные принципы и этапы получения моноклональных антител
а) получение миеломной линии; б) получение клеток селезенки от иммунизарованных животных или лимфоцитов от сенсибилизированных лиц; в) создание условий для слияния ,слияние г) селекция рекомбинантов, пассирование, культивирование.


 
 
 
k_86
№№ Содержание вопросов
1 Определение понятия инфекция (инфекционный процесс), инфекционное заболевания. Условия возникновения инфекционного процесса
2 Роль макроорганизма в возникновении инфекционного процесса
3 Механизмы и пути передачи инфекционного агента
4 Формы инфекции. Классификация инфекционных заболеваний
5 Периоды инфекционного заболевания
6 Экспериментальная инфекция
7 Происхождение патогенных микроорганизмов
8 Патогенность, вирулентность, единицы измерения
9 Факторы патогенности микроорганизмов
10 Генетический контроль патогенности
11 Инфекционные свойства вирусов и особенности вирусных инфекций
1.Определение понятия инфекция (инфекционный процесс), инфекционное заболевание
1.1.Инфекционный процесс - эволюционно сложившиеся взаимоотношенитя между восприимчивым макроорганизмовм и патогенным микробов в определенных условиях окружающей среды.
1.2.Инфекционное заболевание - крайняя степень проявления инфекционного процесса, проявляющая себя различными признаками (клиническими, биохимическими, иммунологическими, эпидемиологическими и др.)
1.3.Для возникновения инфекционного процесса необходимо 3 составляющих:
а) патогенный микроорганизм;
б) восприимчивый макроорганизм;
в) определенные условия внешней среды.
2.Роль макроорганизма в развитии инфекционного процесса
2.1.Инфицирующая доза возбудителя - минимальное количество микроорганизмов, способное вызвать инфекционное заболевание
2.2.Входные ворота инфекции - органы и ткани, через которые возбудитель попадает в чувствительный макроорганизм.
3.Механизмы, факторы и пути передачи инфекционного агента
Механизмы Факторы Пути Примеры
Фекально-оральный а)водный
б)алиментарный
в)контактно-бытовой а)вода
б)пищевые продукты
в)грязные руки Брюшной тиф, паратифы, холера, дизентерия
Аэрогенный воздушно-капельный аэрозоль, воздух с пылевыми частицами дифтерия, туберкулез, грипп
Трансмиссивный через укусы кровососущих насекомых блохи, вши, клещи чума, туляремия, клещевой энцефалит
Контактный а)прямой контакт
б)непрямой контакт, трансфузионный, артифициальный а)непосредственный
б)через мед.инструментарий, донорскую кровь венерические заболевания
трахома, гепатиты, ВИЧ
Вертикальный трансплацентарный через плаценту от матери плоду краснуха, внутриутробные инфекции
4.Формы инфекции и их характеристика
4.1.Основные формы инфекционных болезней
Признаки Названия
По виду возбудителя а) бактериальные б) вирусные
в) грибковые г) смешанные
По длительности пребывания в организме а)острые б) хронические
в) персиситирующие г)носительство
По распространению инфекционного агента а)бактериемия в)вирусемия г)токсинемия д)септикопиемия е)септико-токсический шок
По поражению различных систем а)кишечные б)верхних дыхательных путей в)кровяные г)кожных покровов
По источнику инфекции а)антропонозы б)зоонозы в)антропозоонозы г)сапронозы
По степени распространенности а)спорадическая заболеваемость б)вспышка в)эпидемия г)пандемия д)экзотическая инфекция
4.2.Повторные инфекционные заболевания, вызванные теми же или другими инфекционными агентами.
Вторичная инфекция - присоединение другой инфекции к уже вызвавшей заболевание
Реинфекция - повторное заражение тем же возбудителем после выздоровления
Суперинфекция - повторное поступление новой дозы возбудителя в организм до его выздоровления
Рецидив - возврат симптомов ранее перенесенного заболевания
4.3.Раневые инфекции (инфекции наружных покровов) - возбудитель попадает в чувствительный организм через порезы, ссадины и другие травматические повреждения, сопровождающиеся нарушением целостности кожных покровов и/или слизистых (столбняк, газовая гангрена)
5.Периоды инфекционного заболевания
а)инкубационный
б)продромальный
в)разгар основных симптомов
г)выздоровление
6.Экспериментальная инфекция
6.1.Методы исследования, связанные с применением и использованием животных называются биологическими или экспериментальными а используемые животные - экспериментальными или лабораторными. При заражении их может быть искусственно воспроизведен инфекционный процесс. Это производят с целью:
6.1.1.Изучение патогенности и вирулентности микроорганизмов.
6.1.2.Выделения чистой культуры возбудителя из различных материалов (метод биопробы) с целью диагностики инфекционных заболеваний.
6.1.3.Определения эффективности вакцинно-сывороточных препаратов.
6.1.4.Изучения клиники, патогенеза, патоморфологических изменений при различных инфекционных заболеваниях.
7.Патогенность, вирулентность, единицы измерения
7.1.Патогенность - потенциальная способность микроорганизмов вызывать инфекционное заболевание
7.2.Вирулентность - количественный показатель патогенности и ее фенотипического проявления
7.3.DLM (dosa letalis minima) - наименьшее количество микроорганизмов или ядовитых продуктов их жизнедеятельности, вызывающее гибель всех зараженных экспериментальных животных
7.4.LD50 - то же что и DLM, вызывающее гибель половины животных, более принятый показатель, рассчитывается статистическими методами независимо от числа погибших экспериментальных животных
7.5. Условия, влияющие на вирулентность
а) условия культивирования;
б) пассажи через организм чувствительных животных;
в) возраст культуры;
г) действие различных физических и химических факторов;
д) обработка культур бактериофагом.
8.Факторы патогенности микроорганизмов
8.1.Факторы патогенности и их характеристика
Структурные и химические компоненты бактериальной клетки Ферменты патогенности Токсины
а) капсулы
б) пили
в) жгутики
г) антигены а) гиалуронидаза
б) нейраминидаза
в) плазмокоагулаза
г) лецитиназа а) экзотоксины
б) эндотоксины
8.2.Факторы патогенности обусловливают
а)инвазивность (внедрение и распространение по макроорганизму)
б) аггрессивность (выживание, способность к размножению в макроорганизме, поражение различных его систем)
в) токсичность (ядовитость)
8.3.Бактериальные токсины. Отличия экзо- и эндотоксинов
Свойства Вид токсина
Основные особенности Экзотоксины Эндотоксины
Локализация выделяются наружу прочно связаны с бактериальной клеткой
Химическая природа белки липополисахариды
Отношение к повышенной температуре термолабильны термостабильны
Токсичность высокая умеренная
Антигенность высокая умеренная
Органотропность выраженная отсутствует
Действие на макроорганизм специфическое неспецифическое
Возможность получения анатоксина возможная нет
9.Инфекционные свойства вирусов и особенности вирусных инфекций
9.1.Патогенность вирусов называется - инфекциозность
9.2.Факторы патогенности вирусов
а) нуклеиновая кислота
б) облигатное внутриклеточное паразитирование
в) белки капсида и суперкапсида;
г) внутриклеточные включения;
д) антигены.
9.3.Формы вирусных инфекций
Виды инфекций Характеристика
Острая Быстрое внедрение вируса и его репродукция, быстрое освобождение макроорганизма и его выздоровление
Длительное пребывание в организме (персистенция)

а) латентная длительное носительство, нередко без клинических проявлений
б) хроническая нередко наблюдается вирогения, выделение вируса возможно в ряде случаев только в периоды обострения
в) медленная длительный инкубационный период, вирогения, постепенное нарастание симптомов неизбежно заканчивающееся гибелью макроорганизма

 
 
 
k_86
14 Май 2009 @ 11:46
“Экология микроорганизмов. Микрофлора организма человека. Дисбактериоз”
№№ Содержание вопросов
1 Экология микроорганизмов. Особенности микрофлоры человека как совокупности микробных биоценозов
2 Микрофлора кожи
3 Микрофлора ротовой полости
4 Микрофлора желудочно-кишечного тракта
5 Микрофлора дыхательных путей
6 Микрофлора коньюнктивы глаза
7 Микрофлора уха
8 Микрофлора мочеполовой системы
9 Значение нормальной микрофлоры человека в его физиологии
10 Гнотобиология и гнотобионты
11 Возрастные особенности микрофлоры человека
12 Дисбактериоз (определение, причины возникновения, классификация)
13 Патогенез дибактериоза
14 Лабораторная диагностика дисбактериоза
15 Принципы лечения и профилактики дисбактериоза

1.Экология микроорганизмов. Особенности микрофлоры человека как совокупности микробных биоценозов
1.1.Экология - наука (один из разделов биологии), изучающая роль живых организмов и их взаимоотношения в природе
1.2.Экология микроорганизмов - раздел общей экологии, изучающий места обитания микроорганизмов и их взаимоотношения.
1.3.Биотоп - место обитания популяции, характеризующееся относительно постоянными условиями.
1.4.Микробиоценоз (микробное сообщество) - совокупность популяций различных видов микроорганизмов, обитающих в определенном биотопе.
1.5.Экосистема - система, состоящая из биотопа и микробиоценоза.
1.7.Нормальная микрофлора человека (эумикробиоз) - совокупность микроорганизмов во всех биотопах человека, сложившаяся в процессе эволюции.
1.8.Популяция - совокупность особей одного вида, обитающих в пределах биотопа.
1.9.Аутохтонная микрофлора - совокупность микроорганизмов, для которых данный биотоп является основным, естественным местом обитания.
1.10.Заносная микрофлора - микроорганизмы-иммигранты из других биотопов или окружающей среды.
1.11.Облигатная (обязательная) микрофлора - аутохтонные микроорганизмы, обитающие у всех представителей данного вида постоянно.
1.12.Факультативная (необязательная) микрофлора - аутохтонные виды, выявляемые у некоторых особей непостоянно.
2.Микрофлора желудочно - кишечного тракта
2.1.Микрофлора ротовой полости
Кокки Палочки Извитые формы
Грам (+) Грам (-) Грам (+) Грам (-)
Стафилококки
Стрептококки
Пептококки
Пептострептококки Вейлонеллы
Нейссерии Лактобациллы
Коринебактерии
Актиномицеты
Бифидобактерии Бактероиды
Фузобактерии
Пропионибактерии Трепонемы
Бореллии
Лептоспиры
2.2.Нормальная микрофлора толстого кишечника
Микрофлора Аэробная Анаэробная
Облигатная Кишечная палочка
Энтерококки Бифидобактерии
Лактобактерии
Факультативная Протеи
Стафилококки
Синегнойная палочка
Дрожжеподобные грибы Клостридии
Пептококки
Вейлонеллы
4.3.Фазы развития нормальной микрофлоры кишечника у ребенка
1 фаза - асептическая - первые часы после родов
2. фаза - возрастающей обсемененности - первые 3 дня жизни, гр(+) и гр(-) бактерии, кишечная палочка, лактобактерии, бактероиды
3 фаза - трансформации - 4 - 6 день, заселение кишечника лактобактериями и бифидобактериями, вытеснение гнилостной микрофлоры
4 фаза - становление микробиоценоза, свойственного взрослому человеку - при переходе на смешанное вскармливание, кишечная палочка, энтерококки
4.4.Значение нормальной микрофлоры в физиологии человека
а) защитная, выраженный антагонизм по отношению к патогенным микроорганизмам;
б) синтез витаминов;
в) инактивация токсических веществ;
г) синтез аминокислот;
д) регуляция водно-солевого обмена;
е) синтез ферментов;
ж) участиве в становлении и развитии иммунной системы;
з) участие в синтезе липидов, нейтральных жиров;
и) стимуляция перистальтики кишечника;
к) воздействие на морфологическую структуру слизистой кишечника
5. Гнотобиология и гнотобионты
5.1.Гнотобиология - раздел экспериментальной биологии, изучающий гнотобионтов
5.2.Гнотобионты - высшие живые организмы, выращенные искусственно в безмикробных условиях.
1.Дисбактериоз (определение, причины возникновения, классификация)
1.1. Дисбактериоз (дисбиоз, дисмикробиоценоз) - качественные и/или количественные изменения микрофлоры в сторону увеличения числа микробов-симбионтов, не присутствующих в норме (или присутствующих в небольших количествах) у здоровых людей, при этом происходит срыв адаптационных механизмов а также нарушение защитных и компенсаторных функций.
1.2.Основные причины развития дисбактериозов -
а) нерациональная антибиотикотерапия;
б) острые и хронические инфекционные заболевания;
в) хирургические вмешательства, особенно на органах брюшной полости;
г) снижение защитных сил организма в результате неблагоприятных внешних воздействий (облучение, переутомление, переохлаждение, перегревание, голодание и др.);
д) авитаминоз;
е) нерациональное питание;
ж) действие некоторых аллергенов;
з) резкое изменение привычного образа жизни;
и) стрессы.
1.3.Классификацию дисбактериозов предложил акакдемик А.Ф.Билибин, который подразделил их:
А.По клиническому течению:
1.Местные (или локальные)
2.Распространенные;
3.Латентные.
Б.По виду преобладающего патогенного микроба:
1.Стафилококковые
2.Протейные
3.Дрожжевые
4.Колийные
5.Ассоциативные
В.По степени компенсации патологического процесса
1.Компенсированные
2.Субкомпенсированные
3.Декомпенсированные
2.Патогенез дисбактериоза
2.1.Фазы патогенеза дисбактериоза кишечника
а) начальная - значительное увеличение количественного содержания нормальных симбионтов в естественных местах их обитания;
б) резкое снижение содержания некоторых нормальных симбионтов за счет увеличения других микроорганизмов, которые в норме либо встречаются в небольших количествах или вовсе отсутствуют у большинства здоровых лиц; увеличивается содержание стафилококков и гемолитической кишечной палочки, снижается содержание бифидо- и лактобактерий;
в) миграция нормальной флоры из других биотопов через защитные барьеры в лимфу, кровь, внутренние органы;
г) повышение токсичности и вирулентности отдельных представителей условно-патогенной микрофлоры на фоне выраженной аллергизации и аутосенсибилизации макроорганизма.
3.Лабораторная диагностика дисбактериоза
3.1.Для выявления нарушений в количественном и качественном составе микрофлорпы экотопа применяется бактериологический метод исследования. При этом полученные показатели сравниваются с таковыми у здоровых лиц. Диагностика основана на выявлении бактерий, доступных для культивирования, качественный и количественный состав которой позволяет судить о нормальном состоянии или наличия дисбактериоза.
3.2.Критерии нормы кишечной микрофлоры (по Р.В.Эпштейн - Литвак)
Виды микрорганизмов Количественный состав в норме (клеток на 1 г ) у здоровых лиц
Возбудители кишечных инфекций Отстутствуют
Бифидум бактерии не менее 108 - 1010
Типичные E.coli не менее 107 - 108
Лактозонегативные энтеробактерии не более 106 - 107
Энтерококки не более 105 - 107
Стафилококки не более 104
Протеи не более 104
Гемолитические формы не более 104
Грибы рода Candida не более 103
В ряде случаев проводят дополнительное исследование на наличие синегнойной палочки, клебсиелл, клостридий, которые встречаются у части здоровых лиц в небольших количествах.
3.3.Этапы исследования испражнений при диагностике дисбактериоза кишечника
А.Этапы приготовления серийных разщведений - 1 г фекалий помещают в 9 мл изотонического раствора поваренной соли и делают кратные разведения до 10-11.
Б.Высев из каждого разведения по 0,1 мл на несколько питательных сред:
Выявляемые микроорганизмы Питательные среды Степень разведения суспензии Время инкубации
Бифидумбактерии Среда Блаурокка 10-6 24 часа
Кишечная палочка Эндо, Левина, Плоскирева 10-5 24 часа
Стафилококки ЖСА 10-5 24 часа
Протей Агар по Шукевичу 10-5 24 часа
Гемолитические формы Кровяной агар 10-5 24 часа
Грибы рода Candida Агар Сабуро 10-5 3-5 суток
В.Подсчет числа выросших колоний и определение числа КОЕ в 1 г материала. Производится отсев из 2-3 колоний каждого вида для выделения чистых культур микробов и их последующей идентификации.
Г.Оценка результатов и заключение - производится путем сравнения полученных результатов с нормограммой здорового человека
4.Принципы профилактики и лечения дисбактериоза
4.1.Основной принцип лечения дисбактериоза - направлен на восстановление нормальной микрофлоры кишечника
4.2.Препараты, применяемые для лечения дисбактериоза
Препараты Действующий фактор Особенности применения
Колибактерин Кишечная палочка Необходима отмена антибиотиков
Лактобактерин Лактобацилл Совместим с антибиотиками
Бифидумбактерин Бифидобактерии Совместим с антибиотиками
Бификолл Бифидобактерии + кишечная палочка Необходима отмена антибиотиков
Битолакт-2 Бифидобактерии + кишечная палочка Добавка в молочной смеси
БАД-1Л Бифидобактерии + лизоцим Используют при затяжном течении
Бактисубтил Мутант (споры) со свойствами B.cereus и B.subtilis

 
 
 
k_86
14 Май 2009 @ 11:46
“Генетика бактерий. Мутационная изменчивость. Репарация Рекомбинационная изменчивость. Биотехнология и генная инженерия”

№№ Содержание вопросов
1


2


3


4

 История становления генетики микроорганизмов как науки и ее значение в медицине

Организация генетического аппарата бактериальной клетки. Отличие генома эукариот и прокариот

Понятие о генотипе и фенотипе, видах изменчивости. Модификационная изменчивость, ее проявления и механизмы. Диссоциация.

Генотипическая изменчивость. Мутации. Мутагены. Механизм мутаций. Репарация

5 Рекомбинационная изменчивость, генетические рекомбинации
6 Общая характеристика внехромосомных факторов наследственности
7 Трансформация
8 Трансдукция
9 Коньюгация
10 Биотехнология и генная инженерия
1.История становления генетики микроорганизмов как науки, ее значение в медицине.
1.1.Генетика бактерий - наука, изучающая закономерности наследственности и изменчивости бактерий.
1.2.Наследственность - способность организма передавать те же или иные видовые признаки
1.3.Изменчивость - способность организма в процессе жизнедеятельности изменять свои видовые признаки и свойства.
1.4.О.Эвери, К.Мак-Леод, К.Маккарти доказали, что материальной основой наследственности является ДНК.
2.Организация генетического аппарата бактериальной клетки. Отличия геномов эукариотов и прокариотов.
2.1.Хромосома бактериальной клетки представляет собой замкнутую в кольцо суперспирализованную 2-цепочечную молекулу ДНК.
2.2.Ген - последовательность ДНК, несущая информацию об определенном белке, протеиде или биохимической функции.
2.3.Отличие генома прокариот от эукариот
Прокариоты Эукариоты
1. Отсутствие ядерной мембраны 1. Наличие ядерной мембраны
2. Хромосома циркулярная 2. Хромосомы имеют линейное строение
3. Гаплоидный набор генов 3. Диплоидный набор генов
4. Нет гистонных белков 4. Наличие гистонов
5. Воспроизведение путем репликации 5. Воспроизводство путем митоза
3. Понятие о генотипе и фенотипе, видах изменчивости. Модификационная изменчивость, ее проявления и механизмы. Диссоциация.
3.1. Генотип - совокупность генов, определяющая потенциальную способность клеток к проявлению тех или иных признаков и свойств.
3.1.Фенотип - внешнее проявление генотипа.
3.3.Модификационная (фенотипическая изменчивость) - изменения признаков и свойств, не связанных со структурными изменениями генотипа (первичной структуры ДНК).
3.4.Диссоциация - внутривидовая изменчивость, проявляющая себя образованием различных типов колоний на плотных питательных средах.
4.Генотипическая изменчивость
4.1.Генотипическая изменчивость - изменчивость, обусловленная структурной перестройкой генотипа (первичной структурой ДНК)
4.2.Мутации - стойкие наследственно закрепленные изменения свойств микроорганизмов, связанные с изменениями первичной структуры ДНК
4.3.Виды мутаций
Генные (точечные) - связаны с изменениями всего одной пары пуриновых и/или пиримидиновых оснований.
Хромосомные- более масштабные и часто затрагивающие несколько генов
а) делеции - выпадение участка ДНК
б)дупликации - возникновение повторяющихся последовательностей в структуре ДНК
в)инверсии - возникновение участков, изменивших свое положение в обратном направлении
4.4.Мутагены
Виды мутагенов Примеры
Физические УФЛ, температурные воздействия, магнитные поля, ионизирующая радиация
Химические Акридиновые красители, азотистая кислота, аналоги азотистых оснований
Биологические Антибиотики, умеренные или дефектные фаги, фитонциды
4.5.Репарация - процесс восстановления первоначальной структуры поврежденной ДНК посредством ферментных систем
4.6.Виды репараций:
а) фотореактивация (световая) б) темновая
1.Рекомбинационная изменчивость, генетические рекомбинации
1.1.Рекомбинационная изменчивость - наследственная изменчивость, обусловленная встраиванием чужеродной ДНК в геном клетки хозяина.
2.Общая характеристика внехромосомных факторов наследственности
2.1.Плазмиды - генетические структуры, образованные ДНК. Они меньше хромосомной ДНК, пространственно от нее отделены, способны к самостоятельной репликации. Детерминируют признаки, не являющиеся жизненно важными для бактерий.
2.2.Классификация плазмид:
По способности передаваться от одной клетке другой:
а) коньюгативные б) неконьюгативные
По совместимости плазмид в одной и той же клетке:
а) совместимые б) несовместимые
По проявлению детерминируемого признака:
а) криптические б) некриптические
По детерминируемому признаку: F, Col, Hly, Ent, Tox, R и другие
2.3.Спонтанная или индуцированная утрата плазмид называется элиминацией
2.4.Варианты F-плазмид
Статус F-плазмид в клетке Корректное обозначение бактерии
В автономном состянии F+ (донор)
В интегрированном в хромосому хозина Hfr
В автономном состоянии с фрагментами ДНК клетки-хозяина F
Отсутствие в клетке F - (реципиент)
2.5. R - плазмиды обусловливают лекарственную устойчивость, нередко множественную
2.6. Индуцированная R-плазмидой лекарственная устойчивость связана с
а) изменением проницаемости поверхностных структур бактериальной клетки для антибиотиков;
б) синтезом ферментов, инактивирующих антибиотики;
в) появлением обходных путей метаболизма
2.7.Бактериоциногенные плазмиды детерминируют синтез бактериоцинов
Бактериоцины - антибиотические вещества белковой природы, синтезируемые бактериями и подавляющими рост и размножение близкородственных микробов. Синтез бактериоцинов является летальным для клетки-продуцента. Бактерии, обладающие потенциальной способностью синтезировать бактериоцины но не продуцирующие их в данный момент, устойчивы к их действию. В отличие от других плазмид, фактор бактериоциногенности реже интегрируется в хромосому, редко элимируется, многие такие плазмиды не обладают коньюгативностью.
2.8.Способность выделять бактериоцины используется при:
бактериоцинотипировании, иногда проводится с эпидимиологической целью для выявления источника инфекции так же как и фаготипирование.
2.9.IS-элементы - короткие вставочные последовательности ДНК, несущие гены, ответственные за перемещение и внедрение транспозонов.
2.10.Tn-элементы (транспозоны) - сложные вставочные последовательности ДНК, несущие гены, отвечающие за перенос, внедрение и синтез различных веществ или определенные функции, признаки (например лекарственная устойчивость)
3.Трансформация
3.1.Трансформация - вид рекомбинантной изменчивости, возникающей после внедрения экзогенной ДНК, выделенной из другой клетки.
4.Трансдукция
4.1.Трансдукция - вид рекомбинантной изменчивости, при которой передача генетического материала от донора реципиенту осуществляется с участием умеренных или дефектных фагов.
5.Конъюгация
5.1.Коньюгация - вид рекомбинантной изменчивости, при которой передача генетической информации происходит при непосредственном контакте клетки-донора и клетки-реципиента путем передачи плазмид через пили II типа.
5.2.Различная роль клеток в коньюгации зависит от наличия или отсутствия F-плазмид
6.Биотехнология и генная инженерия
6.1.Биотехнология - использование культур клеток животных, бактерий, дрожжей, растений, метаболизм которых обеспечивает выработку необходимых человеку продуктов и веществ.
6.2.Генная инженерия - совокупность методов, позволяющих получить in vitro рекомбинантные молекулы с заранее заданными свойствами, в том числе и не встречающиеся в природе.

 
 
 
k_86
14 Май 2009 @ 11:43
Зачет по теме “Морфология, физиология и биохимия микроорганизмов”
Вопросы к зачету
1.Медицинская микробиология, ее задачи, значение в практической деятельности врача.
2.Основные этапы исторического развития микробиологии. А.Левенгук - первооткрыватель микробов. Работы Л.Пастера и Р.Коха, их значение для медицинской микробиологии. Роль отечественных ученых в развитии медицинской микробиологии.
3.Основные принципы систематики и классификации бактерий.
4.Понятия: вид, штамм, клон, чистая и смешанная культура.
5.Виды микроскопии: световая, темнопольная, фазово-контрастная, люминесцентная, электронная.
6.Определение понятия "морфология бактерий" и основные формы бактерий.
  7.Строение бактериальной клетки.
  8.Клеточная стенка бактериальной клетки. Отличия в строении клеточной стенки у грамположительных и грамотрицательных бактерий.
  9.L - формы, сферопласты, протопласты.
 10.Цитоплазма, цитоплазматические включения, органеллы бактериальной клетки.
 11.Нуклеоид бактерий.
 12.Капсулы бактерий, методы их обнаружения
 13.Жгутики, ворсинки. Методы выявления жгутиков и пилей.
 14.Споры и спорообразование. Методы обнаружения спор.
 15.Тинкториальные свойства бактерий. Методы окраски бактерий.
 16.Простые и сложные методы окраски. Механизм взаимодействия красителей с отдельными структурами бактериальной клетки.
 17.Окраска по Граму, сущность метода.
 18.Кислотоустойчивые бактерии, методы их выявления.
 19.История открытия вирусов и развития вирусологии как науки.
 20.Морфология вирусов, их химический состав.
 21.Основные принципы классификации вирусов.
 22.Репродукция вирусов.
 23.Стадии взаимодействия вируса с чувствительной клеткой.
 24.Бактериофаг, строение, свойства.
 25.Механизм взаимодействия вирулентного фага и бактерий.
 26.Вирулентный и умеренный фаги. Профаг. Лизогения. Лизогенная (фаговая) конверсия.
 27.Практическое использование фагов.
 28.Химический состав микробов.
 29.Питание бактерий, механизм, типы питания.
 30.Условия культивирования микробов, требования к питательным средам.
 31.Классификация питательных сред.
 32.Дифференциально-диагностические среды.
 33.Действие физических и химических факторов на микроорганизм.
 34.Понятие о стерилизации, обеспложивании, дезинфекции.
 35.Методы стерилизации.
 36.Дробные методы стерилизации.
 37.Рост и размножение микробов. Фазы роста и размножения микробов в жидкой питательной среде.
 38.Методы выделения чистой культуры аэробных бактерий.
 39.Этапы выделения чистой культуры аэробных бактерий (бактериологический метод диагностики).
 40.Культуральные свойства бактерий.
 41.Пигментообразование.
 42.Ферменты бактерий, классификация.
 43.Изучение ферментативной активности бактерий.
 44.Значение ферментов в идентификации бактерий.
 45.Дыхание бактерий, типы дыхания.
 46.Методы культивирования анаэробов.
 47.Методы выделения чистых культур анаэробов, этапы бактериологического исследования.
 48.Понятие о химиотерапии, химиопрофилактике и химиопрепаратах. Химиотерапевтический индекс. Требования к химиопрепаратам.
 49.История открытия химиопрепаратов (Парацельс, Зинин, Романовский, Эрлих)
 50.Антибиотики (определение)
 51.История открытия антибиотиков (А.Флеминг, Чейн, Флори, Ермольева З.В.)
 52.Понятие о симбиозе, паразитизме и антагонизме у микроорганизмов (Пастер, Павловский, Полотебнев, Маласеин, Мечников).
 53.Классификация антибиотиков, единица активности, единица действия.
 54.Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам.
 55.Механизмы действия антибиотиков на микроорганизмы.
 56.Осложнения при лечении антибиотиками.
 57.Лекарственная устойчивость микроорганизмов и пути ее предупреждения.
 58.Методы лабораторной диагностики вирусных инфекционных заболеваний.
 59.Особенности вирусологического метода.
 60.Современные методы культивирования вирусов.
 61.Культивирование вирусов в организме восприимчивых животных.
 62.Метод овокультур.
 63.Выращивание вирусов в культуре клеток.
 64.Методы индикации и идентификации вирусов.
 65.Реакции гемагглютинации и гемадсорбции в вирусологии.
 66.Выделение, идентификация и титрование бактериофагов.
 

План практических занятий по разделам
Генетика, экология,инфекции и иммунитет
ТЕМА Номер занятия
Генетика бактерий. Мутационная изменчивость. Репарация Рекомбинационная изменчивость. Биотехнология и генная инженерия 9
Экология микроорганизмов. Микрофлора организма человека. Дисбактериоз 10
Учение об инфекции 11
Введение в иммунологию.Факторы неспецифической резистентности. Антигены. Антитела 12
Иммунная система человека. Органы иммунной системы. Дисфункции иммунной системы 13
Иммунологические методы. Серологические реакции 14
Вакцины и сыворотки 15
Клтническая иммунология. Клиническая микробиология 16
Зачетное занятие 17